一、操作步驟
1、準備工作
確保實驗室環境清潔，實驗臺面整潔有序。準備好所需的固相萃取柱、樣品、試劑、過濾設備等。 戴上實驗手套和安全眼鏡，保障操作安全。
2、樣品預處理
將待處理樣品溶解在合適的溶劑中，根據樣品性質選擇溶劑，如水溶性樣品可選擇水或緩沖溶液，有機樣品可用有機溶劑。
進行過濾操作，可使用濾膜過濾，目的是去除樣品中的固體雜質，確保樣品溶液濃度適中，避免過濃或過稀影響后續萃取效果。
3、裝填與平衡
將固相萃取柱垂直放置在支架上。
用適當的溶劑對柱進行平衡，對于C18柱等反相柱，常用甲醇進行預處理，甲醇能濕潤吸附劑表面并滲透鍵合烷基相，使硅膠表面更易被潤濕；正相柱則用樣品所在有機溶劑預處理；離子交換柱根據樣品基質是極性或非極性溶劑采用相應溶劑預處理，且要讓大約1ml的預處理溶劑留在管過濾片上以保持填料潤濕。
4、樣品加載
緩慢地將預處理后的樣品溶液加入到萃取柱頂部，使樣品在固相填料中均勻分布。如果加入速度過快，樣品可能分布不均，導致部分填料未能與樣品充分接觸。
5、沖洗填料
若分析物保留在填料上，先用不能洗脫目標化合物的溶液沖洗，去除雜質。然后用比樣品基質強度高但又不至于洗脫分析物的溶劑沖洗，例如對于弱酸性分析物，可以先用低pH值溶液沖洗雜質，再用適宜洗脫液洗脫。
6、洗脫
用少量能洗脫分析物的溶液沖洗填料，洗脫液在填料上停留適當時間，分多次少量洗脫比一次大體積洗脫效果更好。
7、收集洗脫液
將洗脫液收集到試管或燒瓶中，注意避免交叉污染。
8、再生、清洗和存儲
根據需要，使用適當再生溶劑將殘留雜質和化合物洗脫，清洗后把萃取柱存放在干燥、避光處。
9、記錄數據
記錄樣品處理、使用情況和實驗結果等數據，便于結果分析和實驗復現。
二、使用技巧
流速控制方面，如重力法使用時流速宜慢，讓樣品與填料充分作用。
在選擇萃取柱時，要根據樣品性質選擇合適的柱類型，像弱陰離子和酸性樣品可選柱。
盡量避免復雜的洗脫程序，以簡單有效為原則。
為了確保結果可靠，固相萃取柱應使用一次。
